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RT-RAA實(shí)現(xiàn)甲型流感病毒的快速檢測(cè)

2024-03-29 11:02:20 3055

流行性感冒(influenza,簡(jiǎn)稱流感)是流行性感冒病毒引起的季節(jié)性急性上呼吸道感染疾病,其傳染性強(qiáng)、傳播速度快,主要通過(guò)空氣中的飛沫、人與人之間的接觸或與被污染物品的接觸傳播。該疾病的典型臨床癥狀可能包括:發(fā)熱、寒顫、頭痛、肌肉酸痛和干咳等。流感每年的發(fā)病率均較高,高發(fā)期一般在秋冬季節(jié),嚴(yán)重者可死亡。因其可對(duì)嬰幼兒、老年人等高危人群造成極大危害,世界衛(wèi)生組織(WHO)將其劃入了全球性監(jiān)測(cè)疾病的范疇。

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流感的常見(jiàn)癥狀

流行性感冒病毒 簡(jiǎn)稱流感病毒,是一種 RNA病毒 ,呈球形或絲狀,直徑在80 nm到120 nm之間,分為甲型、乙型、丙型三型,這三型具有相似的生化和生物學(xué)特征。流感病毒有一層脂質(zhì)囊膜,膜上有蛋白質(zhì),由凝血素(H)和神經(jīng)氨酸酶(N)組成,均具抗原性,易發(fā)生變異。 甲型流感病毒 主 要有H和N變異,H有16個(gè)亞型,N有9個(gè)亞型,因此甲型流感病毒又分很多亞型,近年來(lái)常見(jiàn)的包括H1N1亞型、H7N9亞型等。

流感病毒結(jié)構(gòu)

鑒于其危害性,   建立能 快速、 準(zhǔn)確檢測(cè)甲型流感病毒 的方法,對(duì)于流感患者 的臨床診斷和及時(shí)有效的治療是很有必要的,這也能對(duì)全球的流感流行趨勢(shì)起到預(yù)見(jiàn)性的作用。

RT-RAA法是將逆轉(zhuǎn)錄酶與RAA(recombinase aided amplification,重組酶介導(dǎo)等溫核酸擴(kuò)增)體系偶聯(lián),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)RNA樣本的快速擴(kuò)增的新型核酸擴(kuò)增技術(shù)。

在甲型流感病毒檢測(cè)的過(guò)程中,逆轉(zhuǎn)錄病毒來(lái)源的逆轉(zhuǎn)錄酶首先會(huì)將甲型流感病毒的核酸通過(guò)反轉(zhuǎn)錄過(guò)程由RNA單鏈轉(zhuǎn)變?yōu)镈NA雙鏈,隨后,在重組酶(recombinase)、單鏈結(jié)合蛋白(single strand DNA-binding protein)和DNA聚合酶(DNA polymerase)的共同作用下,DNA雙鏈完成變性、與引物配對(duì)和延伸的過(guò)程。

已有研究表明,使用RT-RAA方法,并配套奇天基因自主研發(fā)的QT-RAA-F6100檢測(cè)儀器,就能在等溫條件下(37~42℃)實(shí)現(xiàn)對(duì)甲型流感病毒的快速、特異性檢測(cè)。

參考文獻(xiàn):陳淑丹, 羅鵬, 張小平,等. 甲型流感病毒的逆轉(zhuǎn)錄重組酶介導(dǎo)核酸擴(kuò)增快速檢測(cè)方法研究[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2018(5).

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